黎長征（廣西大化瑤族自治縣人民醫(yī)院 廣西大化 530800）
【關(guān)鍵詞】尿常規(guī) 尿液分析儀 顯微鏡檢查
尿液是血液通過腎小球濾過、腎小管和集合管的重吸收及排泄產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物[1]。尿液在調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)、酸堿平衡及排泄廢物中起到十分重要的作用，由于血液與全身各組織、器官的密切關(guān)系，因此尿液的組成和性狀可反映機(jī)體代謝情況及各系統(tǒng)功能狀態(tài)，尤其與泌尿系統(tǒng)疾病直接有關(guān)。尿液檢驗又稱尿液分析，是泌尿系統(tǒng)進(jìn)行疾病診斷、療效及預(yù)后判斷的首選項目[2]。
尿液一般檢驗主要包括傳統(tǒng)的物理學(xué)（肉眼）檢查、化學(xué)檢查和顯微鏡檢查�，F(xiàn)代尿液一般檢驗以尿干化學(xué)試帶和尿液化學(xué)分析儀方法替代傳統(tǒng)的化學(xué)檢查，具有快速正確的優(yōu)點，但不能代替?zhèn)鹘y(tǒng)的尿沉渣顯微鏡檢查[3]。現(xiàn)代尿液檢驗方法，尚有放射免疫法、尿酶聯(lián)免疫法、色譜法、分子生物學(xué)法、電鏡法、流式細(xì)胞儀法等多種檢驗方法，可檢測尿中各種蛋白、氨基酸、酶、激素、抗體、細(xì)胞因子等，對診斷疾病及估計治療效果起了十分重要的作用[4]。
1 尿沉渣顯微鏡檢查
此項檢查是尿常規(guī)檢查中的重要項目之一。尿沉渣檢查是用顯微鏡對尿沉淀物進(jìn)行檢查，識別尿液中細(xì)胞、管型、結(jié)晶、細(xì)菌、寄生蟲等各種病理成份；輔助對泌尿系統(tǒng)疾病作出診斷、定位、鑒別診斷及預(yù)后判斷的重要常規(guī)試驗項目[5]。在一般性狀檢查或化學(xué)試驗中不能發(fā)現(xiàn)的變化，�？赏ㄟ^沉渣檢查來發(fā)現(xiàn)。尿沉渣檢查可分為非染色尿沉渣鏡檢、染色尿沉渣鏡檢和尿沉渣定量檢查。非染色尿沉渣鏡檢，應(yīng)取混勻新鮮尿液，直接涂片或取10ml尿離心（水平式離心機(jī)、離心半徑15cm，1500r/min，378G）離心5min后棄去上清液，留下0.2ml沉渣，輕搖離心管，使沉渣有形成并充分混勻，取尿沉渣20ul，滴入載玻片上，用18 18mm的蓋玻片覆蓋。尿沉渣鏡檢觀察，用10 10鏡頭，觀察其中有形成份的全貌和管型。用10 40鏡頭觀察鑒定細(xì)胞成份和計算數(shù)量，應(yīng)觀察10個視野所見最低和最高值，再計算出平均每一個視野的數(shù)值，記錄結(jié)果。管型用高倍鏡鑒定，但計數(shù)數(shù)量按低倍鏡觀察20個視野，算出平均一個視野平均值，記錄結(jié)果。參考值：①細(xì)胞成份；每高倍鏡視野所見的最低～最高值；紅細(xì)胞0～3/HP；白細(xì)胞0～5/HP。②管型（透明）：每低倍鏡視野平均值0～1/全片。③尿結(jié)晶和鹽類數(shù)量以每一高倍視野（+）、（2+）、（3+）、（4+）報告[2]。染色尿液沉渣鏡檢可分為離心法及混勻一滴尿法。離心法敏感，檢測陽性率高，為目前住院病人，尤其是內(nèi)科和泌尿科病人常規(guī)檢測方法，但其手續(xù)繁瑣、費時，且因操作條件不同，如離心的尿量、轉(zhuǎn)速和時間、保留尿沉渣體積等不同而使結(jié)果不一致[6]�；靹蛞坏文蚍ê唵我仔�，但陽性率低，易漏診，常用于非泌尿系統(tǒng)疾病的過篩檢查，除明顯混濁的血尿、膿尿外應(yīng)強(qiáng)調(diào)用離心法，用染色時透明管型不易漏檢，也有助于其它細(xì)胞成份結(jié)構(gòu)觀察。尿沉渣定量檢查，其方法為過篩法和一小時尿沉渣計數(shù)。過篩法主要留取病人新鮮晨尿，混合后直接滴入血細(xì)胞計數(shù)池內(nèi)，計數(shù)5大格中紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞及管型數(shù)，結(jié)果 2得出每ul內(nèi)的數(shù)。參考值：正常人每ul新鮮尿中紅細(xì)胞、白細(xì)胞、小圓上皮細(xì)胞為0～2/ul，超過了2～5/ul為可疑，＞10/ul為陽性。1小時尿沉渣計數(shù)，其方法為：患者先排尿棄去，準(zhǔn)確收集3小時尿液于清潔干燥容器內(nèi)送檢，準(zhǔn)確測量3小時尿量，充分混合。取混勻尿液10ml，置刻度離心管中，1500r/min離心5min，用吸管吸棄上層尿液9ml，留下1ml，充分混勻。吸收混勻尿液1滴，注于血細(xì)胞計數(shù)板內(nèi)。細(xì)胞共數(shù)十大方格，管型計數(shù)20個大方格。參考值：紅細(xì)胞0～100000/1小時尿；白細(xì)胞0～200000/1小時尿，管型＜3400/1小時尿[7]。
對尿沉渣有形成份的識別除了應(yīng)用普通光學(xué)顯微鏡之外，還可用偏差顯微鏡、位相顯微鏡、熒光顯微鏡進(jìn)行檢測。尿沉渣顯微鏡檢查以它獨特的臨床價值仍是尿液分析中不可缺少的檢查手段[8]。但由于尿沉渣操作費時，在大批量標(biāo)本檢查時，特別是門診病人急需試驗結(jié)果時，每個標(biāo)本都經(jīng)嚴(yán)格操作得出沉渣報告是困難的，因此需要找一個簡單、快速的方法進(jìn)行篩選，將完全正常的標(biāo)本篩出后，有利于對異常的標(biāo)本進(jìn)行規(guī)范性檢查，干化學(xué)尿液分析提供了篩選的試驗手段[9]。
2 尿液自動化學(xué)分析儀
現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，使尿液化學(xué)分析實現(xiàn)了自動化，在尿液化學(xué)分析儀上運用多聯(lián)尿干化學(xué)試帶可同時檢測尿液中10多種化學(xué)成分。干化學(xué)分析是利用液體標(biāo)本直接加到干燥試劑上，以標(biāo)本中水為溶劑引起特定化學(xué)反應(yīng)的方法�？赏瑫r測定尿PH、尿蛋白質(zhì)、葡萄糖、酮體、隱血、膽紅素、尿膽原、亞硝酸鹽、白細(xì)胞、比密等[10]。近年來11聯(lián)尿試帶也已問世，增加了除上述10項外的抗壞血酸項目，來反映尿中維生素C的含量。尿液自動化學(xué)分析儀工作的基本原理是反射光度法。即用尿干化學(xué)分析試帶與尿中相應(yīng)化學(xué)成份反應(yīng)，當(dāng)該產(chǎn)生顏色變化的試帶，被波長不同的發(fā)光二極管照射后，產(chǎn)生反射光。反射光由光電管接受，光信號轉(zhuǎn)化成為電訊號，電訊號傳送至模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器，轉(zhuǎn)換成數(shù)值，經(jīng)微處理控制器處理，自動顯示結(jié)果。通常試帶顏色深淺與被測中物質(zhì)在一定濃度范圍內(nèi)成正比，而與反射光的強(qiáng)度成反比[11]。其操作方法為：吸取混勻尿液約10ml，在尿分析儀上作尿化學(xué)10項測定，測試完畢后，標(biāo)本再以1500r/min離心沉淀5min，棄去上清液，取沉渣約0.2ml涂片鏡檢。尿干化學(xué)分析儀參考范圍：PH5～7，比重（SG）1.015～1.025；蛋白質(zhì)（pro）陰性；葡萄糖（GLU）陰性；酮體（KET）陰性；膽紅素（BIL）陰性；亞硝酸鹽（NIT）陰性；白細(xì)胞（LEU）陰性；紅細(xì)胞陰性：維生素C 20～100mg/L。尿液自動化學(xué)分析儀操作簡便、快速、準(zhǔn)確、結(jié)果可靠，在許多國家已經(jīng)把它作為常規(guī)方法在臨床檢驗中廣為應(yīng)用[12]。開機(jī)平衡后幾分鐘即可報告結(jié)果，故極適合用于急診標(biāo)本。另外，由于干化學(xué)分析除了儀器和干片外，無需貯備任何其它試劑和配制任何溶液，故對于相對獨立的門診部或診所及病人的床頭檢查和家庭監(jiān)護(hù)，這類儀器極為適用。但也有其缺點，如果使用不當(dāng)或許多中間環(huán)節(jié)及影響因素都將直接影響自動化分析結(jié)果的準(zhǔn)確性，不僅會引起實驗結(jié)果的誤差，甚至延誤診斷，因此要求操作者對自動化儀器的原理、性能、注意事項及影響因素等方面的知識有充分了解，正確使用自動化儀器，這樣才能使尿液分析儀得出的結(jié)果更可靠、準(zhǔn)確[13]。自動分析也不能完全取代涂片鏡檢，尤其是管型、紅細(xì)胞、膿細(xì)胞、結(jié)晶等可能漏檢或不正確，所以說不能完全依賴尿液分析儀，必須結(jié)合鏡檢，才能糾正分析儀不能檢出的結(jié)果，為臨床提供正確報告，故鏡檢在尿檢查中是十分重要的[14]。
3 全自動尿液分析儀
目前尿沉渣檢查多采用人工顯微鏡檢查作為主要檢測手段，然而其遇到的首要問題是方法如何統(tǒng)一，鏡檢如何標(biāo)準(zhǔn)化。在整個手工鏡檢過程中，取多少尿離心，離心力大小，離心時間長短，最后剩下多少沉渣物，取多少鏡檢；所加蓋玻片的面積，顯微鏡放大倍率、觀察多少視野及報告方式等，國內(nèi)外很不一致。同時由于尿標(biāo)本成分復(fù)雜、成分鑒別的主觀性、尿沉渣的報告方式不統(tǒng)一、尿沉渣參考值不一致等原因，使得檢測結(jié)果由于報告速度慢、檢驗人員勞動強(qiáng)度大，檢測結(jié)果個體誤差大、重復(fù)性較差而無法滿足臨床的要求[15]。SYSMEX公司研制生產(chǎn)的全自動尿有形成份分析儀UF-100在這樣的背景下應(yīng)運而生，由于它具有手工操作無法比擬的重要精度，可以完全自動地對尿液中各有形成份作模擬鑒別和計數(shù)，并能獲得多項更客觀而有效的分析結(jié)果，其定量報告可有助于臨床的療效監(jiān)控。其對紅細(xì)胞形態(tài)的鑒別可有助于臨床了解泌尿系統(tǒng)出血部位以及儀器的高檢測效率等多方面的先進(jìn)性與優(yōu)越性，而成為尿沉渣檢查篩選手段的首選工具[16]。UF-100全自動尿有形成份分析儀采用先進(jìn)的激光流式細(xì)胞檢測技術(shù)及熒光染色技術(shù)，并與電阻抗測定法結(jié)合對尿有形成份進(jìn)行直接鑒別及計數(shù)，使自動化尿檢獲得了重大突破。UF-100裝備有綜合性數(shù)據(jù)提示信號系統(tǒng)，可協(xié)助操作員迅速確定需要復(fù)查的標(biāo)本。由用戶定義的數(shù)據(jù)提示信號還可以設(shè)定需要的分析靈敏度，幫助檢測可疑標(biāo)本，為臨床提供有用信息。觸摸感應(yīng)式的彩色液晶屏幕不僅可以顯示數(shù)據(jù)，同時還可以輸入字母及數(shù)據(jù)，分析操作只需將標(biāo)本架設(shè)置在所定的位置上，按下按鈕，便可啟動自動分析功能，使實驗室具有卓越的效率。UF-100還具有綜合質(zhì)量控制程序，備有12個文件及每個定量參數(shù)的180個數(shù)據(jù)，提供可信賴的監(jiān)控系統(tǒng)，以保證最佳性能。可存儲1000個標(biāo)本的散射圖和直方圖，還包含標(biāo)本的物理化學(xué)特性的綜合數(shù)據(jù)。雙向連接口能夠?qū)崿F(xiàn)測試指令與主機(jī)及化學(xué)定性檢查裝置之間的全自動通訊，從而建立了一個可靠的多功能工作站[17]。UF-100測定原理為：吸入800ul尿液后自動加以稀釋和混合，并對細(xì)胞、細(xì)菌等有形成份作特異性染色，通過加壓使細(xì)胞進(jìn)入充滿鞘液的流室。因鞘液的約束下細(xì)胞排成單列，經(jīng)流室噴嘴噴出，形成的細(xì)胞柱與激光束垂直相交，使激活的細(xì)胞產(chǎn)生熒光。流式細(xì)胞入口兩端電極間的恒定直流電使有形成份通過時產(chǎn)生與細(xì)胞大小呈正比的電阻變化。通過測定前向散射光、熒光的波幅和強(qiáng)度及電阻抗的變化報告12個參數(shù)，對細(xì)菌、白細(xì)胞等5種有形成分進(jìn)行分析[18]。UF-100操作簡便，檢測速度快，無需離心標(biāo)本，僅需70s便可生成打印的檢驗報告，每小時能完成100份標(biāo)本的檢測，可使臨床醫(yī)生在第一時間段獲得尿液檢查的有關(guān)信息，但也有假陽性、假陰性結(jié)果，還不能完全取代傳統(tǒng)顯微鏡鏡檢，雖可用于臨床尿路感染的篩檢，但不可替代定量細(xì)菌培養(yǎng)。
綜上所述，尿流式沉渣分析、尿干化學(xué)與傳統(tǒng)手工操作是三種完全不同原理的分析方法，雖然都能分析尿中紅細(xì)胞、白細(xì)胞、蛋白質(zhì)、細(xì)菌等，但由于原理不同，結(jié)果肯定不一致。只有認(rèn)識了它們的原理，才能正確理解認(rèn)識這種差異[19]。無論上述哪一種方法，都不能說是很完善的篩檢方法。但相比較而言，UF-100假陰性率最低，且檢測速度快，相對于尿沉渣鏡檢或試紙法來說，UF-100篩檢效果較好，能滿足對陽性標(biāo)本作進(jìn)一步的病原體分離培養(yǎng)、鑒定及藥敏試驗的需求。若結(jié)合干化學(xué)試帶和鏡檢，可以為臨床提供更多、更準(zhǔn)確的信息。
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